Principio della tecnologia degli strumenti PCR

La sonda Taqman marcata con fluoresceina viene miscelata con il DNA del modello per completare il ciclo termico di denaturazione ad alta temperatura, rinaturazione a bassa temperatura, estensione moderata della temperatura e viene seguita la regola di reazione a catena della polimerasi. La sonda Taqman complementare al DNA del modello è scissa e fluorescente. Il pigmento è libero nel sistema di reazione ed emette fluorescenza sotto specifica fotoeccitazione. All'aumentare del numero di cicli, il frammento del gene bersaglio amplificato cresce esponenzialmente e l'intensità del segnale di fluorescenza cambia con l'amplificazione misurata dal rilevamento in tempo reale. Il valore CT è ottenuto e, allo stesso tempo, utilizzando una pluralità di standard di concentrazioni di modelli noti come controllo, è possibile ottenere il numero di copie del gene del campione da testare.